Проблема охраны здоровья рыб становится главной задачей российской аквакультуры

В Калининграде состоялась конференция «Контроль безопасности рыбы, нерыбных объектов животного происхождения и  продукции из них».

В своем выступлении заведующая лаборатории по вирусным болезням рыб, кандидат ветеринарных наук, ФГУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» Россельхознадзора (ФГУ «ВНИИЗЖ») г. Владимир. Мороз Наталья Владимировна, сообщила о перспективах научных исследований по разработке новых методов

диагностики вирусных болезней рыб. Об этом говорится в материалах конференции, которые поступили в www.fishnet.ru

В последнее время вопросам рыбной отрасли уделяется повышенное внимание. Самым крупным производителем аквакультуры на всем постсоветском пространстве является Россия. Этому способствовало наличие целого ряда предпосылок: большие площади естественных водоёмов, водохранилищ, прудов, большое число хозяйств индустриального типа, отработанные технологии культивирования гидробионтов, наличие квалифицированных специалистов. Динамичный рост этой отрасли заметен в последние годы во многих регионах Российской Федерации. Ученые считают, что за счет развития аквакультуры можно будет восполнить природные популяции многих ценных промысловых видов рыб (осётр, семга, лососевые) и в то же время удовлетворить потребности рынка.

Однако, как показывает мировой опыт промышленного разведения рыбы, интенсификация аквакультуры связана с появлением целого ряда проблем, среди которых главными являются болезни объектов разведения. С развитием торгово-экономических отношений проблема охраны здоровья рыб становится главной задачей специалистов, работающих в этой отрасли, так как это одна из основных причин распространения инфекционных болезней в мире.

Основой рационального планирования и эффективного осуществления мероприятий по борьбе с инфекционными болезнями рыб должен стать эпизоотологический мониторинг, который должен осуществляться специалистами ветеринарной службы и рыбной отрасли. Организация эпизоотологического мониторинга позволит упорядочить диагностику инфекционных болезней рыб и повысить эффективность оздоровительных мероприятий.

Среди инфекционных заболеваний рыб большое внимание уделяется болезням, которые вызываются вирусами. Из девяти болезней в списке декларируемых особо опасных и опасных болезней Международного эпизоотического бюро семь вирусной этиологии. Среди них есть и зарегистрированные в России: инфекционный некроз гемопоэтической ткани лососевых, весенняя виремия карпов. Данные болезни входят и в Перечень карантинных и особо опасных болезней рыб Российской Федерации.

Эти болезни рыб впервые описаны в конце 60-х, начале 70-х гг. и в настоящее время хорошо изучены. На основании клинических признаков поставить диагноз на вирусные заболевания сложно, так как они часто протекают в ассоциации с бактериальными инфекциями. У пораженных рыб при клиническом осмотре отмечают вялость, нарушения координации движений, экзофтальм, увеличение передней части брюшка, анемию, точечные кровоизлияния в периокулярной соединительной ткани глаз, у оснований и в межлучевой ткани плавников, на поверхности тела и изредка на голове.

Патологоанатомические изменения при вирусных болезнях рыб также не являются патогномоничными. При вскрытии в полости тела обнаруживают скопление прозрачного желтоватого (иногда кровянистого) экссудата, множественные кровоизлияния на серозных оболочках внутренних органов и мышечной ткани, анемичность печени, почек и селезёнки, катаральное или геморрагическое воспаление желудочно-кишечного тракта.

Для постановки диагноза на вирусное заболевание требуются лабораторные исследования по выделению вирусов или специфических противовирусных антител.

В России существует сборник документов по организации ветеринарного надзора за рыбохозяйственными предприятиями и инструкции по борьбе с основными инфекционными и инвазионными болезнями рыб. В этом сборнике есть «Методические указания по идентификации вирусов и лабораторной диагностике вирусных болезней рыб», где приведён список наиболее опасных и экономически значимых вирусных болезней рыб, а также изложены стандартизованные методы отбора, транспортировки и обработки вирусологического материала, выделения и идентификации вирусов и серологического обследования рыбоводных хозяйств. В Методических указаниях хорошо проработаны все перечисленные методы, но большим недостатком является отсутствие информации об используемом оборудовании в работе лаборатории по болезням рыб, в частности  вирусным, и нечёткая методика постановки реакции нейтрализации для идентификации вирусов рыб, которая не обеспечивает её воспроизводимость, а также отсутствие других современных методик для детекции вирусов болезней рыб.

Международным Эпизоотическим Бюро и Европейской Комиссией для диагностики вирусов рыб рекомендовано использование вирусологических, серологических и молекулярно-биологических методов, которые подробно изложены в «Ветеринарно-санитарном кодексе МЭБ по водным животным».

Система лабораторной диагностики рабдовирусов и других вирусов рыб в мире включает выделение вируса на культуре клеток рыб, постановку биопробы на рыбах и идентификацию выделенного вируса. Своевременный и точный диагноз будет зависеть от времени с момента отбора пробы до её доставки в лабораторию, строгого соблюдения условий, необходимых для выделения и идентификации агента заболевания.

Изолируют вирус на культурах клеток рыб. В настоящее время насчитывается более 430 клеточных линий рыб. Благодаря их большому разнообразию обнаружено около половины из открытых на сегодня почти 400 ихтиовирусов. Получаемые новые клеточные линии позволяют обнаруживать и новые вирусы.

Но многие штаммы вирусов рыб очень трудно изолировать, так как они плохо реплицируются на клеточных культурах. Поэтому наряду с вирусологическими, при лабораторной диагностике вирусов рыб, широко используют серологические методы: реакция нейтрализации (РН), реакция иммунофлуоресценции (РИФ), различные варианты иммуноферментного анализа (ИФА).

Широко используются молекулярно-биологические методы исследования: ПЦР, ПДРФ-анализ (по длине рестрикционных фрагментов), ДНК-зондирование, нуклеотидное секвенирование. Использование молекулярных методов исследования позволило отследить эволюцию вирусов, источники их распространения, выявить потенциальных переносчиков, а также обозначить все факторы, которые могут способствовать распространению вирусов на большие расстояния.

Обнаружение антигена вирусов рыб осуществляют также иммуно-гистохимическим методом в замороженных или фиксированных формалином срезах тканей при различных видах окрашивания. Очень популярны электронно-микроскопические исследования.

Сравнение имеющихся методов диагностики вирусных болезней по данным МЭБ приведено на следующей таблице, где представлены диагностические методы исследования разного патологического материала от икры до взрослой особи с целью постановки предварительного и подтверждающего диагноза. Где А – рекомендованный метод ввиду доступности, специфичности и чувствительности; В – стандартный метод с достаточной специфичностью и чувствительностью; С – редко применяемый метод ввиду стоимости, достоверности и др. факторов; D – метод в настоящее время не рекомендован.

Сравнение методов диагностики вирусных болезней рыб

Где: А – рекомендованный метод ввиду доступности, высокойспецифичности и чувствительности; В – стандартный метод с достаточной специфичностью и чувствительностью; С – редко применяемый метод ввиду стоимости, достоверности и др. факторов; D – метод в настоящее время не рекомендован.

Приведённая оценка несколько субъективно рассматривает данные диагностические методы, однако всё равно видно, что в основе диагностики вирусных инфекций лежит выделение вируса на чувствительной культуре клеток с последующей идентификацией его в ПЦР.

Таким образом, диагноз на вирусные заболевания рыб ставится комплексно с учетом эпизоотологических данных, клинических и патологоанатомических признаков и лабораторных исследований.

Схема диагностики вирусных болезней рыб

На ветеринарном рынке диагностических препаратов для лабораторной диагностики вирусных заболеваний рыб зарекомендовали себя коммерческие наборы фирмы «TEST-LINE Ltd. Clinical Diagnostics» производства Чехии на основе сэндвич-варианта ИФА для детекции вирусов ВВК, ВГС, ИПНЖ в тканевом гомогенате от исследуемой рыбы и культуральной среде. Фирма «СYPRESS» из Дании предлагает диагностические наборы на основе реакции иммунофлуоресценции с мечеными моноклональными антителами для детекции вирусов ВВК, ВГС, ИГН, ИПНЖ. Европейские диагностикумы соответствуют всем стандартам, но ограничиться только их использованием нельзя, так как многие штаммы вирусов болезней рыб имеют свои структурные особенности и использование коммерческих наборов не позволяет провести дифференциальную диагностику, тем более выявить новый, неизвестный науке вирус.

Создание отечественных недорогих диагностических наборов для своевременной диагностики вирусных болезней рыб, стандартизированных по специфичности и активности, будет являться ещё одним шагом вперёд в борьбе с данными серьезным заболеваниями.

Эпизоотическую ситуацию по вирусам рыб надо изучать при проведении ежегодного мониторинга в рыбоводных хозяйствах в весенний и осенний периоды, особенно в районах, граничащих с европейскими и странами СНГ.                                                                                                                             

В Федеральном центре охраны здоровья животных (ФГУ «ВНИИЗЖ») г. Владимира проводится научная разработка средств и методов диагностики, профилактики, лечения и мер борьбы с вирусными болезнями рыб. Стратегия борьбы с вирусными болезнями рыб основана на научно обоснованных программах профилактики и ликвидации вспышек болезней в хозяйствах с учётом анализа эпизоотической обстановки.

Разработки осуществляются в лаборатории вирусных болезней рыб. Специалисты Центра выезжают в рыбные хозяйства различных регионов для сбора материала, анализа эпизоотической обстановки и оказания практической помощи в ликвидации вспышек вирусных болезней. Центр работает над проблемами молекулярной биологии возбудителей вирусных болезней рыб и молекулярной эпизоотологии с целью совершенствования имеющихся и разработки новых средств диагностики и профилактики заболеваний рыб.  Схема ветеринарного обслуживания хозяйства отработана и включает заключение с ФГУ «ВНИИЗЖ» добровольного договора о ветеринарном обслуживании. В Договор по обслуживанию входят следующие услуги:

- диагностические исследования рыб на наличие вирусных заболеваний;

- консультации по вирусным болезням;

- информация по актуальным болезням рыб и их распространение в России и различных регионах Евросоюза;

- инструктаж по контролю за вирусными болезнями рыб в рыбхозе;

- выдача ветеринарного заключения о проведенных диагностических  исследованиях на наличие вирусов у рыб.

Изучением вирусных болезней рыб в России занимается несколько научно-исследовательских учреждений, и проблемы объединения действий НИИ по профилактике вирусных болезней  обсуждались на заседаниях Межведомственной ихтиологической комиссии, совещаниях в Департаменте по ветеринарному и фитосанитарному надзору. На этих заседаниях было рекомендовано подготовить программы и утвердить их. Но необходима Программа, которая бы позволила объединить специалистов России и стран СНГ для решения вопросов с вирусными болезнями рыб. Основная цель программы – это проведение эпизоотологического мониторинга и обеспечение благополучия по вирусным болезням рыб, минимизация экономического ущерба при возможных вспышках, координация и гармонизация (оптимизация) совместных действий ветеринарных служб стран СНГ в этих направлениях. Основные задачи программы:

- создание необходимого нормативно-правового обеспечения для реализации мероприятий ветеринарными службами стран СНГ, включая разработку и утверждение Национальных программ по профилактике и борьбе с вирусными болезнями рыб;

- унификация в соответствии с требованиями МЭБ порядка, средств и методов диагностики болезней, идентификации полевых изолятов вирусов рыб;

- проведение регулярных эпизоотологических обследований рыбоводных хозяйств;

- создание и поддержание резерва вакцин, диагностикумов, химфармпрепаратов, дезинфектантов, автотранспорта и других материально-технических средств для ликвидации возможных очагов ВВК, ВГС, ИГН;

- оперативное проведение работы по ликвидации возможных вспышек и эпизоотий;

- организация на базе ФГУ «ВНИИЗЖ» г. Владимир, ВИЭВ г. Москва, ВНИИВВиМ г. Покров учёбы и стажировок ветеринарных специалистов России и стран СНГ с целью повышения их квалификации по вопросам диагностики, профилактики и методам борьбы с вирусными болезнями рыб.

Такой подход к проведению эпизоотологического мониторинга по вирусным болезням рыб на базе имеющихся средств позволит решить все поставленные задачи и реально оценивать эпизоотическую ситуацию по всем изученным в настоящее время вирусным болезням рыб. Полученная таким образом информация будет способствовать предупреждению заноса и распространению вирусов рыб на территории Содружества, обеспечению благополучия, минимизации экономического ущерба при возникновении вспышек путём их быстрой ликвидации и тем самым обеспечит повышение продуктивности рыбоводства и рентабельность рыбной отрасли в странах СНГ.